انت الان في قسم علوم الكيمياء الحياتية

استخلاص مادة الثرموبلاستين من الحيوانات لاستخدامها في قياس مؤشر سيولة الدم تاريخ الخبر: 31/03/2024 | المشاهدات: 272

مشاركة الخبر :

نرجس جاسم عماره



مادة الثرومبوبلاسين عبارة عن بروتين سكري ينمو من بروتين وجزء من الشحم المفسفر تستخدم كعامل مؤثر مهم في تخثر بلازما الدم (دم الإنسان) مسببة خثرة تسمى بخثرة البروثرومبين والزمن الحاصل لحين حصول الخثرة في بلازما الدم يسمى زمن التخثر أو زمن البروثرومبين والذي يتدخل بشفاء أمراض خطيرة تصيب حياة الإنسان . قامت عدة محاولات لاستخلاص هذه المادة حيث كانت أول محاولة من قبل العالم الطبيب Quieck 1932 – 1939 حيث بدأ باستخراج هذه المادة من أدمغة الأبقار ثم أجريت تحسينات بإضافة عوامل مساعدة من المادة المذكورة أعقبه العالم Owem 1959 بتحسين الطريقة واستخراجها من أدمغة الأغنام والقردة الميتة واستخدم العالم Biggs 1975 المادة من الطيور الى أن تمكن كل من (Lewis) و (Dacie) 1976 من استخراج المادة من أدمغة الأرانب المخصصة للتجارب وبعض الحيوانات الأخرى وأعقبه العالم H. Varly أستاذ الكيمياء الحياتية في العالم معتمداً على طريقة Quieck مضيفاً إليها الكالسيوم كعامل مساعد ومستخدماً أدمغة الأرانب المخصصة للتجارب . ولانقطاع المادة عن العراق من 1991 تقدمنا بهذا البحث بمحاولة استخراجها من أدمغة الأرانب البرية إنشاء الله . المواد وطريقة العمل : تم الحصول على الأرانب من المعهد الفني في الكوت وتم الحصول على الأرانب البرية من المزارعين بجوار منطقة الكوت والسبب في استخدام الأرانب البرية دون غيرها من الحيوانات لكونها تحتوي على أقل نسبة من الدهون والكولسترول الموجودة في أدمغة الأبقار والأغنام وحتى الأرانب المخصصة للتجارب رغم أخذنا نماذج من أدمغة هذه الحيوانات لغرض المقارنة. استخلاص مادة الثرومبوبلاستين : وقد شملت الطريقة ما يلي :
1-يؤخذ خلاصة دماغ الأرنب المذبوح وينظف من الأوردة والشرايين الظاهرة والأعصاب والدم المتخثر تنظيفاً جيداً.
2-تؤخذ الكمية المتبقية من خلاصة دماغ الأرنب على أن لا تقل 200 – 250 غم ويمزج مع الأسيتون ويخلط خلطاً جيداً ويترك في وعاء واسع ثم يسحب السائل ويترك الراسب الذي هو خلاصة دماغ الأرنب البري وتتكرر هذه العملية ثلاث مرات إذا ما أريد الحصول على مسحوق نقي.
3-أو يغسل مرة واحدة وتأخذ كمية مقدارها450 ملغم من خلاصة دم الأرنب المغسولة وتوضع في 5 مل من محلول الفينول المحلى (9 غملتر كلوريد الصوديوم) مضافاً اليه في أنبوبة أختبار 1 غم لتر فينول .
4-ضع الأنبوبة الحاوبة على الخلاصة في حمام مائي بدرجة56 درجة مئوية لمدة عشر دقائق مع المزيج المستمر .
5-أعمل تدوير للمعلق بجهازالمنبذة (center fug) لمدة نصف دقيقة 1000 دورة في الدقيقة وتجنب التدوير الطويل .
6-أسحب الجزء المعلق وهو الجزء الفعال في محلول الثرومبوبلاستين النسيجي حيث يبقى هذا صالحاً
.7-أجري الأختبار في لقياس زمن البروثرومبين بأستخدام المرحلة الواحدة للـ -زمن البروثرومبين الطبيعي في هذه العملية سجل رسمياً من 12.5 الى 14 ثانية .